• Für die In-vitro-Diagnose müssen die Kits der Serie 6xxx verwendet werden (ELISA sind verfügbar).

  Nämlich:

• Die Assays der Serie 6xxx für IVD-Anwendungen wurden für Plasma (EDTA) und Urinproben validiert. Alle anderen Arten von Proben – einschließlich Serum – wurden nicht validiert. Serumproben können mit diesen Kits in Forschungsanwendungen verwendet werden.

• Dies hängt von der Probenmenge und der Konzentration des Analyten ab. In den meisten Fällen sollten die Research Kits der Serie 5xxxR verwendet werden. Und zwar:

In manchen Fällen ist es jedoch vorteilhaft, die Kits der Serie BA E-6XXX zu verwenden. Wenden Sie sich daher am besten an unsere Produktspezialisten, die über viel Erfahrung mit verschiedenen Arten von Studien und Protokollen verfügen(support@ldn.de).

• Für die Homogenisierung von Gewebe können verschiedene Puffer verwendet werden. Die Art des Puffers hängt vom Forschungsprojekt ab und davon, ob andere Parameter in der gleichen Probe gemessen werden müssen.
  LDN empfiehlt, das Gewebe in 0,01 M HCl mit 1 mM EDTA und 4 mM Natriummetabisulfit zu homogenisieren. Die Probenverdünnung hängt von der erwarteten Probenkonzentration ab. Wenn diese nicht bekannt ist, empfehlen wir eine serielle Verdünnung mit unterschiedlichen Probenvolumina, um die beste Verdünnung für Ihren speziellen Probentyp zu ermitteln.

• Für dieses Verfahren bieten wir ein ausführliches Protokoll an – bitte fragen Sie nach (support@ldn.de).

• Für einen Zeitraum von bis zu 6 Monaten können die Proben bei -20 ⁰C gelagert werden. Für die Lagerung bei -80 ⁰C liegen uns derzeit keine Daten vor.

• Wenn Sie die Proben für IVD-Zwecke verwenden, müssen Sie den einmal gestarteten Assay ohne Unterbrechung durchführen (gemäß dem Protokoll). Wenn Sie die Proben für Forschungszwecke verwenden, besteht die Möglichkeit, nach dem Extraktionsschritt eine Pause einzulegen. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte support@ldn.de.

• Regelmäßig nehmen wir am Ringversuch von INSTAND (www.instand-ev.de) für Plasma- und Urinproben. INSTAND bietet diese Eignungstests jedes Quartal an.

• Der Patient sollte seinen Arzt fragen, der ihm Richtlinien für die Entnahme der Probe geben wird.

• Nein, derzeit bieten wir solche Angebote nicht an.

• Dies wurde noch nicht getestet. Wenn Sie an dieser Art der Messung interessiert sind, empfehlen wir Ihnen, den hochempfindlichen ELISA (Serie BA E-5xxxR) zu verwenden und einen Proof-of-Principle durchzuführen. Unsere Spezialisten helfen Ihnen gerne bei der Erstellung eines Testprotokolls ( support@ldn.de).

• Ja, es gibt Automaten, die für die automatische Herstellung von Katecholaminen geeignet sind. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte unsere Spezialisten unter support@ldn.de.

• Wenn Sie die Proben verdünnen müssen, können Sie 0,01 N HCl verwenden. Die Proben müssen vor dem Extraktionsverfahren verdünnt werden.

• Unsere Assays weisen das freie Adrenalin, Noradrenalin oder Dopamin nach.

• Um den Abbau von Katecholaminen zu verhindern, geben Sie der Probe so früh wie möglich EDTA (Endkonzentration 1 mM) und Natriummetabisulfit (Endkonzentration 4 mM) zu.

• Der pH-Wert spielt während des Extraktionsverfahrens eine entscheidende Rolle: Ein Übermaß an Säure sollte vermieden werden, um die Pufferkapazität des Extraktionspuffers zu erhalten.
  Ein pH-Wert > von 7,0 während der Extraktion ist obligatorisch.

• Die am häufigsten verwendete Probenmatrix für IVD ist Serum. Der Serotonin-ELISA ^Überholspur (BA E-8900) wurde für Serum validiert. Im Allgemeinen wird Plasma nicht für den Test von Serotonin empfohlen, da die Thrombozyten einer Lyse unterliegen und ihren hohen Gehalt an Serotonin freisetzen könnten. Da der Grad der Lyse sehr unterschiedlich ist und von Probe zu Probe variiert, wird er die Messung in unvorhersehbarer Weise beeinträchtigen.

• Ja.
  Der Serotonin-ELISA für plättchenreiches Plasma ^{Schnelle Spur} (BA E-8900) kann als IVD-Anwendung verwendet werden. Für die RUO-Bestimmung von Serotonin in plättchenarmem Plasma und Liquor muss der hochempfindliche ELISA BA E-5900R verwendet werden.

• Dies wurde noch nicht getestet. Wenn Sie an dieser Art der Messung interessiert sind, empfehlen wir Ihnen, den hochempfindlichen Serotonin-ELISA (BA E-5900R) zu verwenden und einen Proof-of-Principle durchzuführen. Unsere Spezialisten helfen Ihnen gerne bei der Erstellung eines Testprotokolls ( support@ldn.de).

• Ja, auf einer regelmäßigen Basis INSTAND (www.instand-ev.de) bietet Ringversuche für Urin- und Plasmaproben an. INSTAND bietet diesen Ringversuch jedes Quartal an.

• Ja, es gibt Automaten, die für die automatische Bestimmung von Serotonin geeignet sind. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte unsere Spezialisten unter support@ldn.de.

• Für Homogenate und Zellkulturproben wird der hochempfindliche Serotonin-ELISA (BA E-5900R) empfohlen. Besondere Aufmerksamkeit muss dem pH-Wert gewidmet werden, da Serotonin in saurem Milieu nicht stabil ist (die Verwendung eines Stabilisators ist obligatorisch). Die Verwendung von kalten Puffern ist obligatorisch und die Proben sollten nicht zu lange unter sauren Bedingungen gelagert werden.
  Unsere allgemeine Empfehlung für die Vorbereitung von Gewebe ist die Homogenisierung in 0,01 N HCl + 1 mM EDTA + 4 mM Natriummetabisulfit. Homogenisieren Sie das Gewebe, schleudern Sie es ab und verwenden Sie den klaren Überstand für den Assay. Das Verhältnis von Gewebe zu HCl hängt von den erwarteten Konzentrationen ab und auch das Probenvolumen, das extrahiert werden sollte, hängt von den erwarteten Konzentrationen ab. Wenn dies nicht bekannt ist, ist es am besten, relativ niedrige HCl-Volumina zu verwenden und verschiedene Probenvolumina zu extrahieren.

  Für andere tierische Serumproben – wie Maus- oder Rattenproben – könnte der Serotonin Fast Track ELISA (BA E-8900) eine Alternative sein. Unsere Spezialisten haben viel Erfahrung mit verschiedenen Arten von Serotonin-Studien und werden Sie bei der Erstellung Ihres spezifischen Testprotokolls unterstützen(support@ldn.de).

• Nein, derzeit bieten wir solche Angebote nicht an.

• Ja, es gibt Automaten, die für die automatische Bestimmung von Histamin geeignet sind. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte unsere Spezialisten unter support@ldn.de

• Für die Freigabe wird Heparin empfohlen, da weniger basophile Zellen zerstört werden.

• Nein, denn es werden zu viele Zellen zerstört, was zu einem hohen Hintergrundwert führt.

• Für die Messung von Histamin in verschiedenen Tierplasmaproben wird der hochempfindliche Histamin-ELISA (BA E-5800R) empfohlen. Die folgende Tabelle zeigt einige Beispiele von Histaminkonzentrationen, die bei verschiedenen Tieren gemessen wurden:

  Tierarten	Konzentration (ng/ml)
  Maus	22.9
  Ratte	20
  Katze	1.1
  Hund	0.3
  Pferd	0.6

• Im Allgemeinen gibt es viele verschiedene Puffer, die für die Vorbereitung der Zelllysate verwendet werden können und die unseren Assay nicht beeinträchtigen. Um sicher zu sein, dass der Puffer mit dem Assay kompatibel ist, raten wir Ihnen immer, einen Proof of Principle durchzuführen. Sie könnten Ihren Puffer mit GABA spiken und die Wiederfindung messen. Sie könnten den höchsten Standard aus dem Kit für die Aufstockung verwenden.

Ein Überschuss an Säure sollte vermieden werden: Für GABA ist ein pH-Wert von 3,0 während des Extraktionsverfahrens des Assays obligatorisch, für Glutamat ein pH-Wert von 5,0.

• Unsere allgemeine Empfehlung für die Vorbereitung von Gewebe ist die Homogenisierung in 0,01 N HCl + 1 mM EDTA + 4 mM Natriummetabisulfit. Homogenisieren Sie das Gewebe, schleudern Sie es ab und verwenden Sie den klaren Überstand für den Assay. Das Verhältnis von Gewebe zu HCl hängt von den erwarteten Konzentrationen ab und auch das Probenvolumen, das extrahiert werden sollte, hängt von den erwarteten Konzentrationen ab. Wenn dies nicht bekannt ist, ist es am besten, relativ niedrige HCl-Volumina zu verwenden und verschiedene Probenvolumina zu extrahieren.

• Das Fällungsverfahren setzt die gebundene Fraktion in der Probe frei, so dass der Test das gesamte Tryptophan nachweisen kann.

Ja, das Kit kann für verschiedene biologische Proben verwendet werden. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte unsere Spezialisten unter support@ldn.de.

• Nein, wir haben diese Bereiche nicht.

• Ja, bei der Interpretation der Ergebnisse muss eine Grauzone berücksichtigt werden. Diese Grauzone hängt nicht von der verwendeten Methodik ab und spiegelt sich in einem leichten bis mittleren Anstieg von Metanephrin und Normetanephrin bis zum 4-fachen des oberen Cut-Off wider (Eisenhofer et al. 2003). Ca. 20 % der Tumoren befinden sich in dieser Grauzone, insbesondere im Falle des hereditären Syndroms, bei inzidentellen Tumoren und bei sporadischen Phäochromozytomen mit einem Durchmesser von weniger als 1 cm.
  Im Falle eines Ergebnisses im Graubereich wird empfohlen, eine neue Probe zusammen mit einer Anamnese zu entnehmen, die insbesondere Einflüsse wie die Medikation und das Alter des Patienten berücksichtigt.

• Bei der Verwendung unseres Kits empfehlen wir, die Blutprobe in einer aufrechten/sitzenden Position des Patienten zu entnehmen.

• Nein, Serumproben werden nicht empfohlen – man muss EDTA- oder Heparin-Plasma verwenden.

• Ja, es gibt Automaten, die für die automatische Bestimmung dieser Metanephrine geeignet sind. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte unsere Spezialisten unter support@ldn.de.

• Im Prinzip ist es möglich, die Metanephrine bei verschiedenen Tierarten zu messen. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte unsere Spezialisten unter support@ldn.de.

• Medikamente wie Serotonin-Noradrenalin-Wiederaufnahmehemmer, tryzyklische Antidepressiva, MAO-Hemmer, blutdrucksenkende Mittel und L-DOPA können den Metanephrin- und Normetanephrinspiegel beeinflussen. Personen, die solche Medikamente einnehmen, sollten sich vor der Probenentnahme mit ihrem Arzt beraten.
  Sympathomimetika, Sport und Rauchen können ebenfalls den Metanephrin- und Normetanephrinspiegel beeinflussen. Alkohol und koffeinhaltige Getränke sollten am Tag vor und einschließlich des Tages der Probenentnahme vermieden werden.

• Es besteht die Möglichkeit, ein Extraktionsverfahren mit solchen Proben für Forschungszwecke durchzuführen. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte unsere Spezialisten unter support@ldn.de.

• Medikamente wie Protonenpumpenhemmer, selektive Serotonin-Wiederaufnahmehemmer und Histamin-Typ-2-Rezeptor-Antagonisten können den CgA-Spiegel im Serum beeinflussen. Menschen, die solche Medikamente einnehmen, sollten vor der Probenentnahme ihren Arzt konsultieren.

• Regelmäßig nehmen wir am Ringversuch von RfB teil (https://www.rfb.bio ). RfB bietet diese Eignungsprüfung jedes Quartal an.

• Der Assay wurde für Serumproben validiert und Serum muss verwendet werden, wenn Proben für IVD-Zwecke untersucht werden. Für Forschungsanwendungen kann aber auch Plasma eine geeignete Probenmatrix sein.

• Ja, LDN nimmt regelmäßig an dem externen Qualitätsbewertungsprogramm der FAPAS teil. Der teilnehmende Assay ist der HistaSure ELISA ^{Schneller Weg} (FC E-3600).
  Die Ergebnisse sind auf Anfrage erhältlich (support@ldn.de) .

• Ja, der HistaSure ELISA ^{Fast Track} (FC E-3600) nimmt am Performance Tested Method (PTM) Programm des AOAC Research Institute teil und ist seit 2014 AOAC-zertifiziert.

• Für diese Anwendungen ist der HistaSure ELISA ^{Schnelle Spur} (FC E-3600) wurde getestet und wird empfohlen. Für weitere Details kontaktieren Sie bitte unsere Spezialisten unter support@ldn.de .

• Wenn Sie nicht sofort getestet werden, können die extrahierten Proben bei -20 ⁰C eingefroren aufbewahrt werden.

• Nein, ein solches Programm bieten wir nicht an. Aber es gibt gute und zuverlässige kostenlose Online-Berechnungsprogramme, die Sie verwenden können, wie z.B. Myassays.de.

• Ja, für die Durchführung eines Assays auf ELISA-Prozessoren empfehlen wir das HistaSure ELISA ^{Fast Track} (FC E-3600). Dieser Test kann zum Beispiel leicht an den Gemini und andere baugleiche Automaten angepasst werden.

• Die aus der Standardkurve abgelesene Histaminkonzentration ist nicht die Endkonzentration – sondern muss mit dem entsprechenden Verdünnungsfaktor multipliziert werden, der für die Probenvorbereitung verwendet wurde. In der Packungsbeilage sind die Verdünnungsfaktoren für die häufigsten Arten von Probenzubereitungen (Fisch, Wurst, Käse, Milch, Wein und Champagner) aufgeführt.

• Alle bisher getesteten Fischproben sind für den HistaSure ™ ELISA geeignet. ^{Schneller Weg}. Die folgenden Listen zeigen einige wichtige Anwendungen in verschiedenen Matrizen.

  Spezies validiert durch AOAC-Zertifizierung	Fischarten	Präsentation
  	Thunfisch	Dosenstückchen hell
  		gelbe Flosse frisch/gefroren
  	Mahi Mahi	frisch/gefroren
  	Sardinen	in Öl eingelegt
  	Fischmehl

  Spezies durch interne Tests validiert	Fischarten	Präsentation
  	Makrele	geräuchert
  	Sardellen	frisch
  		in Salzlake
  		in Sauce
  	Shad	trocken gesalzen
  		fermentiert
  	Hering	geräuchert
  	Lachs	geräuchert
  	Bonito	lakerda
  	Schwertfisch	frisch
  	Marlin	frisch

  Fischprodukte validiert durch interne Tests	Maledivenfisch
  	Fischsauce (Sardinen/Anchovis)
  	Austernsauce (Austern/Sardinen)

  Bitte kontaktieren Sie uns(support@ldn.de), wenn Sie Ihr gewünschtes Muster nicht in dieser Liste finden – wir werden Ihre Bewerbung prüfen.

• Nein, wenn Sie ein gleichmäßiges Homogenat vorbereitet haben, können Sie für die Filtration/Zentrifugation nur ein kleines Aliquot von ein paar ml entnehmen.

• Nein, die Verwendung eines Schüttlers ist obligatorisch.